| 分類 | 具體要求 |
| 菌液 | 1.提供>200µl左右過夜培養(yǎng)(12h)的菌液,于Eppendorf管中封口保存,防止交叉污染或滲漏(最好是5ml菌液,這樣我們更快處理您的樣品)。 2. 大量樣品測(cè)序,建議在一次性塑料培養(yǎng)皿固體培養(yǎng)基上穿刺培養(yǎng)。 3. 說明載體抗性類型,我們提供氨芐青霉素、羧芐青霉素、卡那霉素、氯霉素、四環(huán)素等抗生素;其余類型抗生素需自備。 |
| PCR產(chǎn)物(已純化) | 1. PCR產(chǎn)物溶于ddH2O中(請(qǐng)勿溶解在TE溶液中)。 2. 濃度大于50ng/µl,體積大于10µl(僅限一個(gè)反應(yīng),每增加一個(gè)反應(yīng),多提供5ul)。 3. 電泳檢測(cè)條帶專一。 |
| PCR產(chǎn)物(未純化) | 1. 片段大于100bp。 2. 請(qǐng)?zhí)峁?0-50µl PCR擴(kuò)增產(chǎn)物(20ng/ul,總量>600ng),取3µl樣品,應(yīng)該能夠清晰的分辨出目的條帶 |
| 質(zhì)粒 | 1. 質(zhì)粒溶于ddH2O中(請(qǐng)勿溶解在TE溶液中),電泳檢測(cè)濃度大于50ng/µl;體積大于10µl(僅限一個(gè)反應(yīng),每增加一個(gè)反應(yīng),多提供5ul)。 2. 需注明載體和插入目的片段長(zhǎng)度、以及測(cè)序要求。 |
| 引物 | 1. 濃度不低于3.2pmol/µl,溶液體積大于10µl;(反應(yīng)數(shù)多需多提供,正常情況下,按2ul/個(gè)反應(yīng)提供)。 2. 隨機(jī)引物(RAPD引物)和簡(jiǎn)并引物,混合引物以及引物長(zhǎng)度不足17bp不能用于測(cè)序。 3. 引物長(zhǎng)度一般在18-23bp比較適合測(cè)序,特異性高。 4. 盡可能提供引物全序列、PCR退火溫度,以供參考。 |