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檢測(cè)認(rèn)證人脈交流通訊錄

熒光抗體的物種

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    •   熒光素標(biāo)記ESA抗體IgG(標(biāo)記抗體)樣本的物種應(yīng)選擇物種相同或有交叉反應(yīng)的抗體,抗體可能與不同物種的同種靶蛋白有交叉反應(yīng),因其氨基酸序列同源性較高,如果樣本的種類(lèi)未列入抗體說(shuō)明書(shū)上的交叉反應(yīng)種屬表中,并不意味著該抗體不適用于檢測(cè)該物種的蛋白,而只是表示該物種尚未用此抗體檢測(cè)驗(yàn)證過(guò),應(yīng)通過(guò)序列比對(duì)的方法來(lái)預(yù)測(cè)交叉反應(yīng),可應(yīng)用Expasy和NCBIBLAST來(lái)進(jìn)行不同物種蛋白同源性比對(duì)。   熒光素標(biāo)記ESA抗體IgG(標(biāo)記抗體)一抗宿主物種的選擇一般說(shuō)來(lái),在使用偶聯(lián)二抗結(jié)合無(wú)偶聯(lián)物的一抗時(shí),一抗宿主動(dòng)物的物種選擇較為重要,對(duì)于免疫組化而言,盡可能選擇與樣本不同種系物種的一抗,從而避免二抗與樣本內(nèi)源性免疫球蛋白產(chǎn)生交叉反應(yīng),例如:檢測(cè)小鼠樣本蛋白,則不應(yīng)選擇小鼠或大鼠源的一抗,選兔源的一抗,則二抗則可選擇偶聯(lián)了檢測(cè)分子(酶、熒光素、等)的抗兔IgG。如果選擇有偶聯(lián)物的一抗則不適用上述情況,除免疫組化外的其它對(duì)不含內(nèi)源性免疫球蛋白樣本的檢測(cè)方法,則抗體宿主物種的影響不大,如對(duì)不含IgG的細(xì)胞裂解物樣本的westernblotting檢測(cè),盡管如此,含有血清的組織裂解物和組織培養(yǎng)上清中含有免疫球蛋白,還原變性樣本中含IgG,在westernblot檢測(cè)中則結(jié)合出現(xiàn)IgG分子50and25kDa的重鏈和輕鏈條帶。二抗的選擇二抗應(yīng)選用與使用的一抗相同的物種來(lái)源,例如:如果你的一抗是小鼠的單克隆抗體,二抗則選抗小鼠的二抗anti-mousesecondary。建議檢查二抗說(shuō)明書(shū)確保該抗體適用于你的檢測(cè)應(yīng)用,二抗一般連接熒光素FITC或發(fā)光團(tuán)。   熒光抗體如有需要?dú)g迎訪問(wèn)以下網(wǎng)址與我們?nèi)〉寐?lián)系   https://www.goybio.com/productshow_5250518.html

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