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A549/FU耐藥細(xì)胞

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A549/FU耐藥細(xì)胞　　細(xì)胞株名稱(chēng)：A549/FU耐藥細(xì)胞人肺癌氟尿嘧啶耐藥株　　種屬：人　　組織來(lái)源：肺　　微生物及支原體檢測(cè)：陰性　　安全性：所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄　　培養(yǎng)條件：A549/FU耐藥細(xì)胞　　完全培養(yǎng)基：90%RPMI-1640+10%胎牛血清+1%P/S+1000ng/ml順鉑　　血清我們推薦用: 　　GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。　　培養(yǎng)條件：37.0Ccarbondioxide(CO2),5% 　　傳代方法：　　收到細(xì)胞后，在倒置鏡下(最好是在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況。　　(一)如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿(mǎn)，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，低速離心，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液(注意不要吸出細(xì)胞)，換10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。　　(二)如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿(mǎn)，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：　　1.低速離心，棄去培養(yǎng)液，用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。　　2.按6-8ml/瓶補(bǔ)加完全培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)瓶中(補(bǔ)加完全培養(yǎng)基至8到10ml)。如果沒(méi)有特別說(shuō)明，收到細(xì)胞后的第一次傳代一般是一傳二。　　注：1、觀察細(xì)胞最好在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行，否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度?？醇?xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X或20X物鏡下。　　2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請(qǐng)換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。　　3、有些細(xì)胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶?jī)?nèi)。　　4、收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)及時(shí)與我們聯(lián)系。　　凍存方法：凍存液：90%胎牛血清，10%DMSO 　　儲(chǔ)存：液氮儲(chǔ)存　　http://www.aolu2015.com/Products-36056751.html 　　https://www.chem17.com/st486623/product_36056751.html

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