檢測認證人脈交流通訊錄
- 腫瘤細胞系培養(yǎng)： 一、貼壁細胞 1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒，將其平躺置于培養(yǎng)箱中進行2-3小時的緩沖，.然后置于無菌操作臺，打開瓶口，將其中的培養(yǎng)液去掉，再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基并置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進行換液以及傳代； 2.待細胞長滿瓶底面積80%-90%，需要對其進行傳代，*次傳代比例為1:2。 3傳代步驟：將0.25%含EDTA胰酶置于37°預熱，倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，往培養(yǎng)瓶中加入1mlPBS，輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1ml預熱好的胰酶，置于37°孵育消化（*次消化需時常取出置于顯微鏡下觀察，以顯微鏡下細胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細胞脫落為消化時間，記錄消化時間，以便于下次消化），消化好后加入1ml完全培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之完全脫落，然后收集細胞懸液，1200rpm離心3min，棄上清，加入完全培養(yǎng)基重懸細胞，進行傳代。 二、懸浮細胞 1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒，然后置于無菌操作臺，打開瓶口，輕輕吹打后，將其中的細胞懸液轉移到離心管中，然后1200rpm離心3min，去上清； 2.將離心好的細胞轉移至T-25瓶中，并加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基，然后將其置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進行換液（離心后去舊液，加入新鮮培養(yǎng)基）； 3.顯微鏡觀察細胞數(shù)目比較多時，對其進行傳代，*次傳代比例為1:2（離心后平均分成兩瓶培養(yǎng)）。 腫瘤細胞系 http://www.qainnuosw.cn/SonList-1775647.html https://www.chem17.com/st373154/erlist_1775647.html
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