檢測(cè)認(rèn)證人脈交流通訊錄
- 紅細(xì)胞裂解液 100ml/500ml 60.00/200.00
紅細(xì)胞裂解液是一種去除紅細(xì)胞最簡(jiǎn)便易行的方法,即用裂解液裂解紅細(xì)胞,它既不損傷有核細(xì)胞又能充分的去除紅細(xì)胞(僅限于哺乳動(dòng)物外周血)。裂解液裂解是一種比較溫和的紅細(xì)胞去除方法,主要用于經(jīng)酶消化分散的組織細(xì)胞的分離純化,淋巴細(xì)胞的分離純化以及組織細(xì)胞蛋白與核酸提取等實(shí)驗(yàn)中紅細(xì)胞的去除。經(jīng)紅細(xì)胞裂解液裂解得到的組織細(xì)胞中不含紅細(xì)胞,可進(jìn)一步用于原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合、流式細(xì)胞分析、核酸與蛋白的分離和提取等。
保存條件:2-8℃保存。
主要成分:NH4Cl,NaHCO3和EDTA。
使用說明
從全血中得到白細(xì)胞:
1,紅細(xì)胞裂解液冰箱預(yù)冷,新鮮抗凝血或者凍存抗凝血,按1:3-5的比例向細(xì)胞沉淀中加入紅細(xì)胞裂解液混勻。
2,800-1000rpm離心3-5分鐘,離心棄去上層紅色液體。
3,收集沉淀部分,再加入原血等體積的紅細(xì)胞裂解液,用去尖吸頭輕輕吹打起來。
4,800-1000rpm離心3-5分鐘,離心棄去上清。
5,如果沉淀還有紅色,可重復(fù)步驟2和3。
6,加入Hank’s液或無血清培養(yǎng)液離心洗2-3次。
7,重懸細(xì)胞,用于培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。如想提取RNA,最好只裂解一次,立刻進(jìn)入下一步實(shí)驗(yàn)。而想提取DNA,可以裂解兩三次。直接進(jìn)入下一步實(shí)驗(yàn)。
組織細(xì)胞樣品:
1.新鮮組織經(jīng)胰酶或膠原酶等消化分散成單個(gè)細(xì)胞懸液,離心棄去上清液。
2.從4℃冰箱中取出ELS裂解液,按1:3-5的比例向細(xì)胞沉淀中加入ELS裂解液(1ml細(xì)胞壓積加入3-5ml裂解液),輕輕吹打混勻。
3.800-1000rpm離心5-8分鐘,離心棄去上層紅色清液。
4.收集沉淀部分,加入Hank’s液或無血清培養(yǎng)液離心洗2-3次。
5.如裂解不完全可重復(fù)步驟2和3。
6.重懸細(xì)胞,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如提取RNA,最好是于步驟4開始使用DEPC水配制的溶液中進(jìn)行。
注意事項(xiàng)
1.本產(chǎn)品經(jīng)無菌處理,請(qǐng)?jiān)跐崈襞_(tái)內(nèi)進(jìn)行操作。
2.為獲得最佳的裂解效果,加入裂解液混勻后可置冰浴中放置3-5分鐘。
3.裂解的所有步驟都可在冰上或4℃進(jìn)行。
4.為了您的健康和安全,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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