檢測(cè)認(rèn)證人脈交流通訊錄
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植物脫氫酶(SDHA)測(cè)試盒操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:操作時(shí)間短,48-50T,可測(cè)40例樣本左右,96-100T,可測(cè)80例樣本左右;
2、取樣量微:常規(guī)操作取樣量50l, 酶標(biāo)儀操作僅需5l即可檢測(cè),部分試劑盒取樣多少請(qǐng);
3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效;
4、再現(xiàn)性好:20倍稀釋線性仍然良好;
5、回收試驗(yàn): X =99%;
6、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng);
7、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細(xì)胞以及細(xì)胞培養(yǎng)上清液等,部分試劑盒適用于檢測(cè)植物,歡迎
儀器:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/生化分析儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
使用須知:
(1)請(qǐng)參照相關(guān)法規(guī)、文獻(xiàn)、MSDs等信息,理解并掌握好試劑的特性,再進(jìn)行安全操作。
(2)通常購(gòu)買(mǎi)試劑時(shí)一定要想到--次性用完。若估算不足有剩余的話,更加注意其他保管和管理。
(3)萬(wàn)一-試劑操作者并非專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員。必須在專(zhuān)業(yè)人士的指導(dǎo)監(jiān)督下進(jìn)行操作。對(duì)于使用后的廢棄物,不要或者舊的試劑,應(yīng)按照相關(guān)法律法規(guī)正當(dāng)處理。
(4)購(gòu)買(mǎi)后,請(qǐng)務(wù)必確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng);做好預(yù)防顛倒,摔壞的措施和管理體制;在使用前再次確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng),做好必要的安全對(duì)策;對(duì)沒(méi)有標(biāo)明其危害特性、有害特性的,也要慎重地進(jìn)行操作;必須帶好防護(hù)用具,小心翼翼進(jìn)行操作。
生化試劑的種類(lèi)與等級(jí)說(shuō)明:
(1)免疫試劑包括抗體及抗血清、正常血清及補(bǔ)體、抗原、免疫組織化學(xué)研究用試劑、細(xì)胞培養(yǎng)用試劑、細(xì)胞分離試劑、凝膠內(nèi)擴(kuò)散法及電泳試劑等。
(2)基因工程用試劑包括基因表達(dá)與基因重組、人工合成蛋白、激素、核酸合成試劑、內(nèi)切酶等。
(3)誘變劑和主要供測(cè)定工作場(chǎng)所與生活環(huán)境中的毒物質(zhì)的致癌性與化學(xué)毒物的致突變性。
(4)工業(yè)用化學(xué)品包括試制開(kāi)發(fā)的工業(yè)用化學(xué)品,有四千種以上,還在不斷增加。
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測(cè)定。
紅細(xì)胞:需按照試劑盒中說(shuō)明書(shū)上紅細(xì)胞的測(cè)定方法進(jìn)行提取后測(cè)定。
動(dòng)物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測(cè)定。
培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測(cè)定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說(shuō)明書(shū)。
植物脫氫酶(SDHA)測(cè)試盒
http://www.szruiqing.com/Products-37431697.html
https://www.chem17.com/st539318/product_37431697.html
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