檢測認(rèn)證人脈交流通訊錄
- 孔雀石綠ELISA檢測試劑盒檢測步驟:
測定前應(yīng)須知:
1、使用之前將所有試劑和需用板條的溫度回升至室溫(20一25℃)。
2、使用之后立即將所有試劑放回28℃。
3、在LISA分析中的再現(xiàn)性,很大程度上取決于洗板的一致性,正確的洗板操作是LISA測定程序中的要點。
4、在所有恒溫孵育過程中,避免光線照射,用蓋板膜封住微孔板。
具體操作:
1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,置于室溫(20~25℃)平衡30min以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
2、取出需要數(shù)量的微孔板,將不用的微孔放入白封袋,保存于28℃。
3、洗滌作液在使用前也需回溫。
4、編號:將樣品和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號,每個樣品和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣品孔所在的位置。
5、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品:加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品5041/孔到對應(yīng)的微孔中,然后加入抗試劑5041/孔,輕輕振蕩混,用蓋板膜蓋板后置25℃避光環(huán)境中反應(yīng)30mn。
6、洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用洗滌工作液250μ1/孔,充分洗滌45次,每次間隔10s,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。
7、加酶標(biāo)物:加入酶標(biāo)物100μ1/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25℃避光環(huán)境中反應(yīng)30min,取出重復(fù)洗板步驟6。
8、顯色:加入底物液A液50μ1/孔,再加底物液B液50μ1/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25℃避光環(huán)境中反應(yīng)15~20min。
9、測定:加入終止液50μ1/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標(biāo)儀于450m處(建議用雙波長450/630m檢測,請在5min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)),測定每孔0D值。(若無酶標(biāo)儀,則不加終止液用日測法可進行判定)。
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